В игре есть несколько комнат, в которых можно загнать самого себя в ловушку без возможности выбраться. Если это произойдёт, GLaDOS откроет аварийный выход. В версии Portal для Xbox 360 за такой «подвиг» даже выдают специальное достижение — «Словно крыса».

Прежде чем GLaDOS стала такой, какой мы её видим в финальной версии игры, у неё было несколько других вариантов дизайна. Среди них — висящий в воздухе мозг, паукообразный механизм и даже перевёрнутая версия картины Боттичелли «Рождение Венеры», созданная из запчастей и проводов.

В одном из офисных помещений можно увидеть презентацию, посвящённую финансовой конкуренции между корпорациями Aperture Science из Portal и Black Mesa из другого творения Valve — Half-Life. Таким образом, действие обеих игр происходит в одной вселенной.